Szybki chromatometr ciekłyProminenece UFLC

Szybka analiza była od dawna używana jako ważny temat techniczny, ale wraz z szybką popularnością LCMS poprawa wydajności stała się pilnym problemem i stała się ważnym czynnikiem przyspieszenia.
Szybka analiza to skrócenie czasu analizy, zazwyczaj poprzez skrócenie kolumny chromatograficznej lub zwiększenie przepływu fazy przepływu. Jednak przy użyciu powszechnie używanych kolumn wypełniających o wielkości cząstek 5 μm wydajność separacji przy użyciu dowolnej metody znacznie spada, co sprawia, że ​​przyspieszenie jest bez sensu.
W związku z tym zostały opracowane dwie metody:
• Używanie wypełnień o małej wielkości cząstek
Ta metoda umożliwi szybką separację. Jednak ze względu na wzrost oporu przepływu w kolumnie chromatograficznej, ciśnienie na poszczególne elementy instrumentu i kolumnę chromatograficzną również znacznie wzrośnie.
• Wysokotemperaturowa separacja
Wyższa temperatura może przyspieszyć rozprzestrzenianie się materiału, zmniejszając jednocześnie opor przepływu w kolumnie chromatograficznej i umożliwiając szybką separację. Analiza wysokiej temperatury jest skuteczna w obniżeniu ciśnienia kolumny, ale wysoka temperatura powoduje pogorszenie kolumny chromatograficznej, powoduje rozkład próbki i inne niedostateczności, które wymagają uwagi podczas zastosowania.
Aby rozwiązać problem ciśnienia zwrotnego, opracowano specjalne urządzenia poprawiające zdolność do ciśnienia, które są zwykle droższe. Jednak te specjalne urządzenia musiały podjąć kompromisy pod względem wydajności i wrażliwości próbek. Ponadto nadmiernie drobne kolumny wypełniające wypełniacze wymagają wysokiego sprzętu, a metoda analityczna opracowana przy użyciu tej kolumny chromatograficznej poświęca wszechstronność. W związku z tym, jeśli urządzenie to zostanie zastosowane w konwencjonalnej analizie HPLC, jego wydajność będzie niższa.
Prominence obsługuje szybkie oddzielanie
Wykorzystując standardowe komponenty, Prominence może zaspokoić zarówno potrzeby badaczy w zakresie tradycyjnej analizy, jak i analizy o wysokiej prędkości, a także obsługiwać temperatury robocze do 85 ° C, umożliwiając szybką analizę pod niższym ciśnieniem, podczas gdy wydajność analityczna i poziomy przepływu są niezwykłe nawet w droższych konfiguracjach instrumentów.
Prominence UFLC obsługuje szybką analizę dzięki następującym funkcjom:
• Małe rury kolumnowe i małe zbiorniki cyrkulacyjne zmniejszają efekt szerokości szczytu zewnętrznego kolumny.
• Użyj Shim-pack XR-ODS o wielkości cząstek 2,2 μm.
Shim-pack XR-ODS to kolumna chromatograficzna nowej generacji szybkiej analizy, która rozważa wyżej wymienione subtelności wypełnień i umiejętnie znajduje równowagę między efektywnością separacji a ciśnieniem, aby poprawić lub utrzymać efekt separacji, jednocześnie skracając czas analizy.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
Automatyczny próbownik Prominence SIL-20A zapewnia bardzo szybkie próbowanie 10 μl w ciągu 10 sekund.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Obsługuje analizę wysokiej temperatury do 85 ° C.
Temperatura i szybka analiza: wraz z wzrostem temperatury kolumny, wzrasta liczba teoretycznych tablic, zwiększa się efektywność kolumny i obniża się ciśnienie kolumny.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Szczyty: 1: benzoeceton 2: benzoaceton 3: benzobuton 4: benzpenton 5: benzohekson 6: benzenanton 7: benzyncydon
Wpływ temperatury na związki: analiza wysokiej temperatury jest skuteczna w obniżeniu ciśnienia kolumny, ale wysoka temperatura powoduje pogorszenie kolumny chromatograficznej, powoduje rozkład próbki i inne niedostateczności, które wymagają uwagi podczas zastosowania. Analiza wysokiej temperatury jest stosowana tylko jako środek pomocniczy do szybkiej analizy.
Detektory z wysoką częstotliwością próbkowania umożliwiają szybkie pozyskiwanie danych bez utraty informacji.
• Specjalizowane oprogramowanie do konwersji metod chromatograficznych umożliwia konwersję zwykłych warunków chromatograficznych do warunków UFLC, zapewniając uniwersalność metody analizy.

Powtarzalność szybkiej analizy
Powtarzalność czasu przechowywania składników w szybkiej separacji jest trudniejsza niż w zwykłej analizie. Powtarzalność czasu zatrzymywania (RSD) zwiększa się w odwrotnej proporcji do zakorzenienia kwadratowego czasu, dzięki czemu wymagane są bardziej rygorystyczne właściwości podawania płynu niż zwykłe analizy. Prominence UFLC zapewnia niezwykłą zdolność do podawania płynu mikroskokowego o rozdzielczości 3 nL/min, a kontrolowana odpowiedź na 0,1 sekundy podczas podawania płynu gradientowego, zapewniając niezwykłą powtarzalność czasu zatrzymania.

Czym jest wysoki przepływ
Celem szybkiej chromatografii ciekłej jest wysoki przepływ, co oznacza, że ​​codziennie lub godzinowo analizuje się więcej próbek. Aby osiągnąć wysoki przepływ, należy nie tylko skrócić czas analizy pojedynczej próbki, ale także zoptymalizować cały cykl próbkowania i czasu analizy. Celem przyspieszenia jest nie tylko skrócenie czasu analizy, ale także skrócenie cyklu analizy. Prędkość wstrzykiwania próbek Prominence UFLC wynosi 10 sekund, co znacznie skraca okres analizy.

Przykłady aplikacji

Analiza UFLC aminokwasów pochodnych PTC

Analiza aminokwasów ma dwie metody wykrywania, jedną z nich jest metoda pochodnictwa po kolumnie po separacji za pomocą kolumny chromatografii wymiany jonowej do ponownego wykrywania pochodnictwa, a drugą jest metoda pochodnictwa przed kolumną po pochodnictwie za pomocą kolumny chromatografii odwrotnej do separacji. Z punktu widzenia szybkiej analizy metoda pochodnej przed kolumną jest skuteczna. Tutaj przeprowadzono analizę aminokwasów w krótszym czasie za pomocą Shim-pack XR-0DS.
Derywacja za pomocą izocyjanu fenylu. Podczas metody pochodnej po kolumnie trwa 1 godzina, podczas gdy metoda pochodnej przed kolumną wymaga 25 minut analizy, która może być skrócona do 4 minut przy użyciu zwykłych kolumn chromatograficznych.

Analiza UFLC barwników

Barwniki dodawane do żywności zawierają związki syntetyczne i naturalne, które są bardzo rozpuszczalne w wodzie i często analizowane za pomocą HPLC. Jednak w przypadku wielu kombinacji barwników, jednoczesna analiza wymaga długiego czasu. Jest to przykład jednoczesnej analizy barwników za pomocą Shim-pack XR-ODS Ultrafast LC. Wyniki jednoczesnej analizy 12 barwników składowych są przedstawione na poniższym chromatogramie. Czas analizy wymagany przy użyciu zwykłej LC wynosi 50 minut, podczas gdy przy użyciu ultraszybkiej LC analiza trwa około 6 minut.

Analiza UFLC wielokrągłych węglowodorów aromatycznych (PAH)

PAH to substancje chemiczne, które określają poziom zanieczyszczenia atmosfery przez gazy spalinowe, takie jak pojazdy. PAH są bardzo rakotwórcze, więc monitorowanie atmosfery tych substancji jest ważnym elementem pomiarowym. PAH wykazują silną fluorescencję i mogą być wykorzystywane do analizy o wysokiej wrażliwości za pomocą detektora fluorescencyjnego.
W przypadku analizy tych 10 PAH, w stanie separacji bez strat, UFLC osiągnął 10 razy szybszą analizę (czas analizy 5 minut) w porównaniu do zwykłej LC (czas analizy 50 minut).